अवलोकन

SP263 क्लोन के साथ PD-L1 अभिव्यक्ति का पता लगाना इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री का उपयोग करके फॉर्मेलिन-फिक्स्ड, पैराफिन-एम्बेडेड ट्यूमर सेक्शन पर PD-L1 प्रोटीन को देखने के लिए किया जाता है। SP263 एंटीबॉडी VENTANA स्वचालित स्ट्रेनिंग प्लेटफॉर्म के लिए विकसित एक खरगोश मोनोक्लोनल अभिकर्मक है, और यह एक साथी निदान के रूप में कार्य करता है जो कई इम्यून चेकपॉइंट इनहिबिटर के लिए पात्रता निर्धारित करने में मदद करता है। परख के सिद्धांत को समझने से यह स्पष्ट होता है कि परिणाम एक साधारण सकारात्मक या नकारात्मक कॉल के बजाय रंगे हुए कोशिकाओं के अनुपात के रूप में क्यों रिपोर्ट किए जाते हैं।

स्टेनिंग का सिद्धांत

विधि एक पतली ऊतक स्लाइड पर एंटी-PD-L1 एंटीबॉडी लगाने से शुरू होती है, जहां यह कोशिका झिल्ली पर व्यक्त PD-L1 प्रोटीन से जुड़ता है। एक द्वितीयक पहचान प्रणाली तब एक क्रोमोजेन जमा करती है जो सूक्ष्मदर्शी के नीचे बंधे हुए स्थलों को एक दृश्यमान भूरे रंग के दाग के रूप में प्रस्तुत करता है। चूंकि PD-L1 कोशिका की सतह पर स्थित होता है, इसलिए स्कोरिंग झिल्लीदार स्टेनिंग पर केंद्रित होती है, और तीव्रता को केवल आंख से अनुमान लगाने के बजाय मान्य थ्रेशोल्ड के मुकाबले व्याख्या की जाती है।

ट्यूमर प्रोपोर्शन स्कोर पढ़ना

पैथोलॉजिस्ट आंशिक या पूर्ण झिल्ली स्टेनिंग दिखाने वाली व्यवहार्य ट्यूमर कोशिकाओं के प्रतिशत का मूल्यांकन करते हैं, जिसे ट्यूमर प्रोपोर्शन स्कोर के रूप में जाना जाता है। विभिन्न साथी निदान दावों में विभिन्न कट-ऑफ का उपयोग किया जाता है: उदाहरण के लिए, नॉन-स्मॉल सेल लंग कैंसर में एटेज़ोलिज़ुमैब को कम से कम एक प्रतिशत ट्यूमर सेल स्टेनिंग के थ्रेशोल्ड से जोड़ा जाता है, जबकि कुछ संकेतों में सेमिप्लिमैब उच्च ट्यूमर सेल थ्रेशोल्ड का उपयोग करता है। इसलिए, एक ही SP263 परख लागू किए गए मान्य स्कोरिंग नियम के आधार पर कई इम्यूनोथेरेपी निर्णयों का समर्थन कर सकती है।

क्लोन की पसंद क्यों मायने रखती है

PD-L1 परख विनिमेय नहीं हैं, क्योंकि प्रत्येक एंटीबॉडी क्लोन एक थोड़ा अलग एपिटोप को पहचानता है और प्रत्येक प्लेटफॉर्म की अपनी स्टेनिंग केमिस्ट्री होती है। प्रयोगशालाओं को सटीक क्लोन और स्कोरिंग एल्गोरिथम की रिपोर्ट करनी चाहिए जिसका उपयोग किया गया था ताकि चिकित्सक परिणाम को सही दवा लेबल से मिला सके। एक स्पष्ट रूप से प्रलेखित, मानकीकृत वर्कफ़्लो साइटों पर स्कोर के नैदानिक ​​अर्थ की रक्षा करता है।

प्री-एनालिटिकल कारक जो स्कोर को प्रभावित करते हैं

नमूना गुणवत्ता PD-L1 स्कोर को दृढ़ता से प्रभावित करती है। बहुत लंबा या बहुत छोटा फिक्सेशन झिल्ली एंटीजन प्रतिधारण को बदल सकता है, और खराब ट्यूमर सामग्री विश्वसनीय रूप से स्कोर करने के लिए बहुत कम कोशिकाएं छोड़ती है। प्रयोगशालाओं को स्टेनिंग से पहले स्वीकार्य फिक्सेशन समय और न्यूनतम ट्यूमर क्षेत्र को परिभाषित करना चाहिए, और उन सीमाओं से बाहर गिरने वाले नमूनों को फ़्लैग करना चाहिए। प्री-एनालिटिकल संदर्भ के साथ रिपोर्ट किया गया परिणाम बिना किसी चेतावनी के जारी की गई संख्या की तुलना में कहीं अधिक भरोसेमंद है।

अक्सर पूछे जाने वाले प्रश्न

प्र: SP263 वास्तव में क्या मापता है?उ: यह क्रोमोजेनिक इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री द्वारा ऊतक खंड में कोशिका झिल्ली पर PD-L1 प्रोटीन को मापता है, जिसे रंगे हुए ट्यूमर कोशिकाओं के अनुपात के रूप में व्यक्त किया जाता है।

प्र: क्या सभी PD-L1 परीक्षण विनिमेय हैं?उ: नहीं, विभिन्न एंटीबॉडी क्लोन और प्लेटफॉर्म को अलग-अलग मान्य किया जाता है, इसलिए रिपोर्ट किया गया क्लोन और स्कोरिंग नियम इच्छित चिकित्सा से मेल खाना चाहिए।

प्र: परिणाम हाँ या नहीं के बजाय प्रतिशत क्यों है?उ: साथी निदान दावे अनुपात थ्रेशोल्ड से बंधे होते हैं, इसलिए स्कोर को यह प्रतिबिंबित करना चाहिए कि कितने ट्यूमर कोशिकाएं मार्कर व्यक्त करती हैं।